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VEXTRA 

Vextra

La facility

La facility per le vescicole extracellulari si trova presso il Centro di Biotecnologie Molecolari dell'Università di Torino e presso la Città della Salute e della Scienza.

La facility è composta da diversi strumenti High-Throughput per la caratterizzazione e lo studio di vescicole extracellulari, anche a livello di singola vescicola. Sono disponibili gli strumenti più innovative nel campo di ricerca. Inoltre, vi sono kit e reagenti specifici e ultracentrifughe dedicate per l'isolamento delle vescicole extracellulari.

La struttura è a disposizione per tutte le aree di ricerca del Dipartimento incentrate sulle vescicole extracellulari, come l’identificazione di biomarcatori, per progetti in campo oncologico e per scopi di medicina rigenerativa. Gli alti standard qualitativi e il costante aggiornamento delle tecnologie e dei protocolli garantiranno un'elevata qualità degli esperimenti. I risultati ottenuti implementeranno i dati generati grazie alle altre facility presenti nel Dipartimento.

Responsabile: Cristina Grange, email cristina.grange@unito.it
Telefono 011/6706460

  1. CellStream®Flow Cytometer (Luminex). Un citofluorimetro di nuova generazione, adatto allo studio e alla visualizzazione di vescicole/nanoparticelle molto piccole, nel range di 100-200 nanometri. (https://www.luminexcorp.com/cellstream-flow-cytometers/#overview)
  2. NanoSight NS300, (Malvern panalytical). Lo strumento NanoSight NS300 fornisce una piattaforma facile da usare e riproducibile per la caratterizzazione delle vescicole/nanoparticelle. L'NS300 consente un'analisi rapida della distribuzione dimensionale e della concentrazione di tutti i tipi di nanoparticelle da 0,01 a 1 µm di diametro.
  3. ExoView ™ R100 (Alfatest). Lo strumento ExoView™ R100 è stato progettato specificamente per soddisfare le esigenze dei ricercatori nel campo delle Vescicole Extracellulari. Lo strumento funziona con un supporto microarray che consente di effettuare diverse misure simultaneamente, ottenendo informazioni sulla concentrazione, sulle dimensione e sull’espressione di specifici marcatori da parte delle vescicole extracellulari. Il kit ExoView Tetraspanin contiene array funzionalizzati con anticorpi contro CD9, CD63, CD81, CD41a.
  4. Super Resolution microscope (ONI Nanoimager). (https://oni.bio/extracellular-vesicles/).La microscopia a super risoluzione permette di superare la barriera di risoluzione dei microscopi ottici convenzionali e consente il rilevamento e la quantificazione di singole proteine ​​e acidi nucleici a livello subvescicolare. Inoltre, la composizione strutturale delle membrane delle vescicole può essere ricostruita con microscopia di localizzazione a singola molecola (SMLM) raggiungendo una risoluzione di 20 nm e può essere utilizzata per identificare le biomolecole specifiche coinvolte nella segnalazione e nel targeting delle vescicole. L'applicazione di tecniche di imaging a super risoluzione serve per l'identificazione la visualizzazione di sottopopolazioni di vescicole e può inoltre fornire importanti informazioni sul ruolo che le vescicole svolgono nella progressione della malattia. In collaborazione con il Dipartimento Di Biotecnologie Molecolari e Scienze per la Salute.
  5. Ultracentrifughe (Becman Coultar). Strumenti dedicati all’isolamento delle vescicole extracellulari/nanoparticelle. Possono essere utilizzate con svariati protocolli. Rotori disponibili: 70ti, 28ti, 90ti, 45ti,sw40ti.

Un elenco di pubblicazioni scientifiche ritenute rilevanti dalla comunità scientifica che si occupa delle vescicole extracellulari. Pubblicazioni che descrivono le procedure analitiche e pre-analitiche per condurre esperimenti di alta qualità(IT).

  • Minimal information for studies of extracellular vesicles 2018 (MISEV2018): a position statement of the International Society for Extracellular Vesicles and update of the MISEV2014 guidelines (2018) (DOI: 1080/20013078.2018.1535750)
  • Considerations towards a roadmap for collection, handling and storage of blood extracellular vesicles (2019) (DOI: 1080/20013078.2019.1647027)
  • Urinary extracellular vesicles: A position paper by the Urine Task Force of the International Society for Extracellular Vesicles (2021) (DOI: 1002/jev2.12093)
  • The quick reference card “Storage of urinary EVs” – A practical guideline tool for research and clinical laboratories (2023) (https://doi.org/10.1002/jev2.12286)

  • Grange C, Tritta S, Tapparo M, Cedrino M, Tetta C, Camussi G, Brizzi MF. Stem cell-derived extracellular vesicles inhibit and revert fibrosis progression in a mouse model of diabetic nephropathy. Sci Rep. 2019 Mar 14;9(1):4468. doi: 10.1038/s41598-019-41100-9.
  • Grange C, Papadimitriou E, Dimuccio V, Pastorino C, Molina J, O'Kelly R, Niedernhofer LJ, Robbins PD, Camussi G, Bussolati B. Urinary Extracellular Vesicles Carrying Improve the Recovery of Renal Function in an Acute Tubular Injury Model. Mol Ther. 2020 Feb 5;28(2):490-502. doi: 10.1016/j.ymthe.2019.11.013.
  • Bruno S, Pasquino C, Herrera Sanchez MB, Tapparo M, Figliolini F, Grange C, Chiabotto G, Cedrino M, Deregibus MC, Tetta C, Camussi G. HLSC-Derived Extracellular Vesicles Attenuate Liver Fibrosis and Inflammation in a Murine Model of Non-alcoholic Steatohepatitis. Mol Ther. 2020 Feb 5;28(2):479-489. doi: 10.1016/j.ymthe.2019.10.016.
  • Pomatto, M., Gai, C., Negro, F., Cedrino, M., Grange, C., Ceccotti, E., Togliatto, G., Collino, F., Tapparo, M., Figliolini, F., Lopatina, T., Brizzi, M. F., & Camussi, G. (2021). Differential Therapeutic Effect of Extracellular Vesicles Derived by Bone Marrow and Adipose Mesenchymal Stem Cells on Wound Healing of Diabetic Ulcers and Correlation to Their Cargoes. International journal of molecular sciences, 22(8), 3851.
  • Grange, C., & Bussolati, B. (2022). Extracellular vesicles in kidney disease. Nature reviews. Nephrology, 1–15. Advance online publication. https://doi.org/10.1038/s41581-022-00586-9.
  • Lopatina T, Koni M, Grange C, et al. IL-3 signalling in the tumour microenvironment shapes the immune response via tumour endothelial cell-derived extracellular vesicles. Pharmacol Res. 2022;106206. doi:10.1016/j.phrs.2022.106206
  • Skovronova, R.; Grange, C.; Dimuccio, V.; Deregibus, M.C.; Camussi, G.; Bussolati, B. Surface Marker Expression in Small and Medium/Large Mesenchymal Stromal Cell-Derived Extracellular Vesicles in Naive or Apoptotic Condition Using Orthogonal Techniques. Cells 2021, 10, 2948.

Educational video: 

 

Ultimo aggiornamento: 18/05/2023 11:08
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